4dda在linux中的意思,Evvail | MaxQuant-蛋白质组DDA数据分析金标准 | Omics - Hunter
MaxQuant是基于質譜(Ms)的蛋白質組學DDA數據采集模式下的數據定量分析金標準,現在廣泛應用于DDA數據分析,支持LFQ和Label的數據分析。
MaxQuant 支持Windows和Linux(Linux版基于mono)
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基本工作原理:
支持市面上幾乎所有儀器設備的原始Raw文件,其搜庫引擎采用了Andromeda,針對不同的方法采用自定義評分方案,對每種特定的碎片化技術的多肽鑒定進行優化,最后利用target-decoy搜索策略估計FDR和控制肽段鑒定種的假陽性。
下面簡單介紹常規的DDA中Label-free的分析步驟:
1)打開 MaxQuant 選擇導入數據(可以選擇導入文件或者文件夾)
2)設置分組等信息
3)特定配置參數
根據你的實驗修飾參數, 消化酶切(一般我們用Trypsin/P)等參數設置
根據你使用的儀器配置Instrument參數
如果是無標定量,在Label-free quantification選擇LFQ
3)設置全局參數
此處主要介紹Sequences和identification參數的配置,第一個主要是配置fasta文件,第二個是需要配置FDR等修改閾值(默認是0.01)
一般我們是從uniport上下載蛋白的fasta序列,點擊Add即可添加,后面的參數像肽段最小長度等一般來說默認就可以了,也可以設置的更加寬松一點,這個根據你的需要來修改。
剩下主要是鑒定打分了,此處默認是0.01,相對比較保守的一個閾值,有人也設置到0.05,提高一些低信號肽的鑒定,但這樣也會影響增加假陽性的可能,當然這之間的取舍還是根據你的實驗目的來。大部分后期還會進行驗證,所以這塊的把控還是按照實驗設計進行,0.01和0.05目前都是被認可的閾值。
其他的高級參數像 target-decoy生成方式等,大家可以自行探索。
4)其他設置
剩下的三個頁面和分析基本上沒什么大的關系了。
性能主要是執行后的一個日志展示;
可視化主要是對Raw文件數據的展示:
組態主要是軟件參數,像修飾等的修改添加等:
5)運行分析
配置完成后,我們根據自己的電腦配置設置處理器數量,如電腦8核設置8即可(個人建議,如果電腦除了跑 MaxQuant 還有其他任務,建議設置數量是你的電腦核數減1):
整個分析過程介紹結束了,大家也可以根據 Nat Protoc文章詳細了解所有的參數信息。
參考資料:
1.http://coxdocs.org/doku.php?id=maxquant:start
2.Tyanova, S., Temu, T. & Cox, J. The MaxQuant computational platform for mass spectrometry-based shotgun proteomics.?Nat Protoc11,2301–2319 (2016).
3.Cox, J. et al. Andromeda: a peptide search engine integrated into the
MaxQuant environment. J. Proteome Res. 10, 1794–1805 (2011).
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總結
以上是生活随笔為你收集整理的4dda在linux中的意思,Evvail | MaxQuant-蛋白质组DDA数据分析金标准 | Omics - Hunter的全部內容,希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。
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