分子生物學(xué)作業(yè)
一、填空

DNA雙螺旋直徑為 （1） nm，每隔 （2） nm螺旋上升一圈。

大腸桿菌DNA聚合酶Ⅲ的 （3） 活性使之具有 （4） 功能，極大地提高了DNA復(fù)制的保真度。

兩條互補(bǔ)的DNA鏈中，用作指導(dǎo)RNA合成的鏈被稱為 （5） ，另一條鏈叫做 （6） 。

DNA變性后，紫外吸收 （7） ，粘度 （8） 。

細(xì)菌的DNA連接酶以 （9） 為能量來源，而動物細(xì)胞和T4噬菌體的DNA連接酶則是以 （10） 為能源。

真核RNA聚合酶Ⅲ位于 （11） 中，負(fù)責(zé) （12） 的合成。

在原核細(xì)胞翻譯起始時(shí)，小亞基16S rRNA的3′-端與mRNA5′-端的 （13） 之間互補(bǔ)配對，確定讀碼框架，fMet- tRNAf占據(jù)核糖體的 （14） 位點(diǎn)。

DNA變性后，浮力密度 （15） ，生物活性 （16） 。

DNA復(fù)制時(shí)，連續(xù)合成的鏈稱為 （17） _鏈；不連續(xù)合成的鏈稱為 （18） 鏈。

真核RNA聚合酶Ⅱ位于 （19） 中，負(fù)責(zé) （20） 的合成。

糖環(huán)上的1′C與堿基嘧啶上的 （21） 相連，與嘌呤上的 （22） 相連。

DNA復(fù)制時(shí)，一條鏈?zhǔn)沁B續(xù)的，另一條鏈?zhǔn)遣贿B續(xù)的，稱為 （23） 復(fù)制；復(fù)制得到的子代分子，一條連來自親代DNA，另一條鏈?zhǔn)切潞铣傻?#xff0c;這種方式叫 （24） 復(fù)制。

原核生物RNA聚合酶核心酶的亞基組成為（25） 中， （26） 負(fù)責(zé)識別轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)。
二、判斷

地衣酚試劑可以使DNA變成藍(lán)色，二苯胺試劑能使RNA變成綠色。

DNA片斷越大，復(fù)性速度越慢。

DNA復(fù)制時(shí)，前導(dǎo)鏈和后隨鏈?zhǔn)怯赏粋€(gè)DNA聚合酶的兩個(gè)活性中心催化合成的，合成方向均為5′→3′。

所有生物的嘧啶二聚體均可用光復(fù)活系統(tǒng)修復(fù)。

基因轉(zhuǎn)錄的終止信號應(yīng)位于被轉(zhuǎn)錄的序列以外的下游區(qū)。

大腸桿菌染色體DNA由兩條鏈組成，其中一條鏈為模板鏈，另外一條鏈為編碼鏈。

生物體內(nèi)，天然存在的DNA分子多為負(fù)超螺旋。

水分子可以插入天然DNA分子雙螺旋的空隙中。

原核生物的DNA聚合酶Ⅰ主要負(fù)責(zé)切除岡崎片段的RNA引物，并用DNA鏈填補(bǔ)缺口。

DNA損傷的錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)一旦發(fā)現(xiàn)錯(cuò)配堿基，就會切除甲基化的鏈，并以未甲基化的鏈為模板進(jìn)行修復(fù)合成。

大腸桿菌的所有基因轉(zhuǎn)錄都由同一種RNA聚合酶催化。

真核生物基因表達(dá)的效率比原核生物高，其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物不需要加工，即可作為模板用于指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成。

B-DNA是細(xì)胞內(nèi)DNA的基本構(gòu)象，在某些情況下還會有A型、Z型和三股螺旋的局部構(gòu)象。

將凝膠上的RNA轉(zhuǎn)移到硝基纖維薄膜上的技術(shù)叫Southern印跡法。

DNA的兩條鏈反向平行，復(fù)制時(shí)，兩條新合成的鏈也按相反的方向延伸。

嘧啶二聚體可以通過重組修復(fù)被徹底去除。

真核生物的RNA聚合酶需要多種蛋白質(zhì)因子協(xié)助，才能與轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)結(jié)合。

原核生物轉(zhuǎn)錄生成的mRNA多數(shù)不需要加工，但rRNA是由初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物加工而成的。

解開DNA的負(fù)超螺旋，會使雙螺旋局部解開形成單鏈區(qū)。

將凝膠上的DNA轉(zhuǎn)移到硝基纖維薄膜上的技術(shù)叫Southern印跡法。

DNA聚合酶可以從頭合成單鏈模板的互補(bǔ)鏈。

嘧啶二聚體指DNA兩條鏈上的嘧啶共價(jià)連接而成的二聚體。

原核生物和真核生物的RNA聚合酶亞基組成差別很大，空間結(jié)構(gòu)卻很相似。

負(fù)責(zé)hnRNA剪接的剪接體是由多種蛋白質(zhì)和多種snRNR構(gòu)成的。
三、名詞解釋

Southern印跡雜交 2. 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 3.移框突變（移碼突變） 4. Tm 5. 內(nèi)含子與外顯子 6. Klenow片段7. 增色效應(yīng) 8 分子雜交 9. 復(fù)制體1. 拓?fù)洚悩?gòu)酶 10. Cot1/2 11. 單鏈結(jié)合蛋白
四、簡答題和計(jì)算題

何謂核酸的變性？哪些因素可以影響Tm的大小。

DNA復(fù)制的精確性、持續(xù)性和協(xié)同性是通過怎樣的機(jī)制實(shí)現(xiàn)的？

某哺乳動物的細(xì)胞中，每個(gè)細(xì)胞的DNA長，細(xì)胞生長周期中的S期約為5小時(shí)，如果這種細(xì)胞DNA延長的速度與E.coli相同，即16 μm/min，那么染色體復(fù)制時(shí)需要有多少復(fù)制叉同時(shí)運(yùn)轉(zhuǎn)？

如果下面的DNA雙鏈從右向左進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。（1） 哪條是有意義鏈？（2） 產(chǎn)生什么樣的mRNA順序？（3）mRNA順序和DNA的反意義鏈順序之間的關(guān)系是怎樣的？
5′A-T-T-C-G-C-A-G-G-C-T 3′ 鏈1
3′T-A-A-G-C-G-T-C-C-G-A 5′ 鏈2

如果人體有1014個(gè)細(xì)胞，每個(gè)體細(xì)胞的DNA含量為6.4 × 109個(gè)堿基對。試計(jì)算人體DNA的總長度是多少？是太陽-地球之間距離（2.2 × ）的多少倍？已知雙鏈DNA每1000個(gè)核苷酸重1 × 10，求人體的DNA的總質(zhì)量。

若使15N標(biāo)記的大腸桿菌在14N培養(yǎng)基中生長三代，提取DNA，并用平衡沉降法測定DNA密度，其14N-DNA分子與14N-15N雜合DNA分子之比應(yīng)為多少？

那些因素能引起DNA損傷？生物體有哪些修復(fù)機(jī)制？

一個(gè)基因如何產(chǎn)生多種不同類型的mRNA分子？

概述影響變性DNA復(fù)性速度的因素。

真核生物DNA聚合酶有哪幾種？它們的主要功能是什么？

概述PCR的基本過程？

原核生物的啟動子和真核生物的三類啟動子各有何結(jié)構(gòu)特點(diǎn)？

肽鏈合成后的加工修飾有哪些途徑？

概述分子雜交的概念和應(yīng)用領(lǐng)域。

已知DNA的序列為：
W: 5′-AGCTGGTCAATGAACTGGCGTTAACGTTAAACGTTTCCCAG-3′
C: 3′-TCGACCAGTTACTTGACCGCAATTGCAATTTGCAAAGGGTC-5′ →
上鏈和下鏈分別用W和C表示，箭頭表明DNA復(fù)制時(shí)復(fù)制叉移動的方向。試問：（1）哪條鏈?zhǔn)呛铣蓽箧湹哪０?（2）試管中存在單鏈W，要合成新的C鏈，需要加入哪些成分?（3）如果需要合成的C鏈被32P標(biāo)記，核苷三磷酸中的哪一個(gè)磷酸基團(tuán)應(yīng)帶有32P? （4） 如果箭頭表明DNA的轉(zhuǎn)錄方向，哪一條鏈?zhǔn)呛铣蒖NA的模板?

DNA和RNA各有幾種合成方式，各由什么酶催化新鏈的合成？

真核生物基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控因子有哪些重要的結(jié)構(gòu)模體？

（1）不考慮合成氨基酸、mRNA、tRNA或核糖體所需的能量，計(jì)算合成由600個(gè)氨基酸殘基組成的大腸桿菌某蛋白需水解多少個(gè)磷酸酐鍵？（2）蛋白質(zhì)的合成為什么需要消耗這樣多的自由能？

總結(jié)

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